5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-glucuronide cyclohexylammoniumzout CAS:18656-96-7

Het effect van 5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-glucuronide cyclohexylammoniumzout (X-glucuronide) is het vermogen om een ​​blauw neerslag of een kleurverandering te veroorzaken in aanwezigheid van het enzym beta-D-glucuronidase. Deze enzymatische reactie vindt plaats wanneer de glycosidische binding tussen de indoolgroep en het glucuronzuurgedeelte wordt verbroken door beta-D-glucuronidase.

X-glucuronide wordt voornamelijk gebruikt in moleculairbiologische en enzymologische experimenten. Het wordt vaak gebruikt als substraat om de activiteit van bèta-D-glucuronidase te detecteren. Enkele specifieke toepassingen zijn:

Reportergenassays: X-glucuronide wordt vaak gebruikt als substraat in reportergenassays waarbij bèta-D-glucuronidase als reporterenzym fungeert. Door het promotorgebied of de coderende sequentie van een gen van belang te fuseren met het bèta-D-glucuronidase-gen, kunnen onderzoekers de expressie of activiteit van het gen meten door de vorming van een blauw neerslag of een kleurverandering te volgen wanneer X-glucuronide wordt toegevoegd.

Bacteriële en gisttransformatieassays: X-glucuronide kan worden gebruikt om de succesvolle transformatie van bacteriën of gisten met een vector die het bèta-D-glucuronidase-gen bevat, aan te tonen. Getransformeerde cellen die het enzym tot expressie brengen, kunnen X-glucuronide hydrolyseren, wat een zichtbare kleurverandering of neerslag oplevert.

Histochemische kleuring: X-glucuronide wordt gebruikt bij histochemische kleuringstechnieken om de aanwezigheid en verspreiding van bèta-D-glucuronidase-activiteit in weefsels of cellen zichtbaar te maken. Deze kleuring maakt het mogelijk om cellen die het enzym tot expressie brengen te lokaliseren en te identificeren.