Fenylgalactoside CAS: 2818-58-8

Effect op enzymactiviteit: Fenylgalactoside wordt vaak gebruikt om de activiteit van het enzym β-galactosidase te meten.Wanneer fenylgalactoside wordt gehydrolyseerd door β-galactosidase, komt p-nitrofenol vrij.De accumulatie van p-nitrofenol kan kwantitatief worden gemeten, waardoor inzicht wordt verkregen in de activiteit van β-galactosidase.Dit effect wordt benut in toepassingen zoals enzymtests en screeningsystemen.

Analyse van genexpressie: Fenylgalactoside wordt vaak gebruikt als substraat in experimenten in de moleculaire biologie om genexpressie te bestuderen.Het lacZ-gen, dat codeert voor β-galactosidase, wordt gewoonlijk gefuseerd met regulerende sequenties van andere interessante genen.De expressie van het lacZ-gen en de hydrolyse van fenylgalactoside door β-galactosidase kunnen het expressiepatroon en het niveau van het onderzochte doelgen aangeven.

Screeningssystemen: Fenylgalactoside is een belangrijk onderdeel van screeningsystemen die gebruik maken van β-galactosidase-activiteit.Een algemeen bekend voorbeeld is de blauw-wit-screeningsmethode, die wordt gebruikt om recombinante of getransformeerde cellen te identificeren in experimenten in de moleculaire biologie.Kolonies die met succes het recombinante DNA hebben opgenomen of genetische recombinatie hebben ondergaan, zullen β-galactosidase tot expressie brengen, wat leidt tot de hydrolyse van fenylgalactoside en de vorming van een blauwe kleur.

Eiwitzuivering: In sommige gevallen kan fenylgalactoside worden gebruikt als ligand voor affiniteitschromatografie om eiwitten te zuiveren die specifiek binden aan of worden geactiveerd door β-galactosidase.Het eiwit van interesse kan een affiniteitstag of een fusietag hebben die een β-galactosidase-bindend domein bevat.Door het eiwitmengsel door een kolom met geïmmobiliseerd fenylgalactoside te leiden, kan het gewenste eiwit selectief worden vastgehouden en vervolgens worden geëlueerd.