IPTG CAS:367-93-1 Fabrikantprijs
Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) is een synthetisch analoog van lactose dat vaak wordt gebruikt in onderzoek naar moleculaire biologie en biotechnologische toepassingen.IPTG wordt voornamelijk gebruikt om de expressie van genen in bacteriële systemen te induceren, waar het dient als een moleculaire trigger om de transcriptie van doelgenen te initiëren.
Wanneer IPTG aan het groeimedium wordt toegevoegd, wordt het door de bacteriën opgenomen en kan het binden aan het lac-repressoreiwit, waardoor wordt voorkomen dat het de activiteit van het lac-operon blokkeert.Het lac-operon is een cluster van genen die betrokken zijn bij het lactosemetabolisme, en wanneer het repressoreiwit wordt verwijderd, komen de genen tot expressie.
IPTG wordt vaak gebruikt in combinatie met de lacUV5-mutante promotor, die een constitutief actieve versie van de lac-promotor is.Door IPTG-inductie te combineren met deze mutante promotor kunnen onderzoekers hoge niveaus van genexpressie bereiken.Dit maakt de productie mogelijk van grote hoeveelheden eiwit voor zuivering of andere stroomafwaartse toepassingen.
Naast genexpressie wordt IPTG ook vaak gebruikt in blauw/wit-screeningtests.Bij deze techniek wordt het lacZ-gen doorgaans gefuseerd met een gen van interesse, en bacteriën die dit fusiegen met succes tot expressie brengen, zullen een actief β-galactosidase-enzym produceren.Wanneer IPTG wordt toegevoegd samen met een chromogeen substraat zoals X-gal, worden bacteriën die het fusiegen tot expressie brengen blauw vanwege de activiteit van β-galactosidase.Dit maakt de identificatie en selectie mogelijk van recombinante stammen die met succes het gen van interesse hebben geïntegreerd.
Inductie van genexpressie: IPTG wordt vaak gebruikt om de expressie van doelgenen in bacteriële systemen te induceren.Het bootst de natuurlijke inductor lactose na en bindt zich aan het lac-repressoreiwit, waardoor wordt voorkomen dat het het lac-operon blokkeert.Dit maakt de transcriptie en expressie van de gewenste genen mogelijk.
Eiwitexpressie en -zuivering: IPTG-inductie wordt vaak gebruikt om grote hoeveelheden recombinante eiwitten te produceren voor verschillende doeleinden, zoals biochemische onderzoeken, therapeutische productie of structurele analyse.Door geschikte expressievectoren en IPTG-inductie te gebruiken, kunnen onderzoekers hoge niveaus van doeleiwitproductie in bacteriële gastheren bereiken.
Blauw/wit screening: IPTG wordt vaak gebruikt in combinatie met het lacZ-gen en een chromogeen substraat, zoals X-gal, voor blauw/wit screeningstesten.Het lacZ-gen wordt doorgaans gefuseerd met het gen van interesse, en bacteriën die dit fusiegen met succes tot expressie brengen, zullen een actief β-galactosidase-enzym produceren.Wanneer IPTG en het chromogene substraat worden toegevoegd, worden recombinante stammen die het fusiegen tot expressie brengen blauw, wat gemakkelijke identificatie en selectie mogelijk maakt.
Studie van genregulatie: IPTG-inductie wordt vaak gebruikt in onderzoek om de regulatie van genen en operonen te bestuderen, met name het lac-operon.Door de concentraties van IPTG te manipuleren en de expressie van lac-operoncomponenten te volgen, kunnen onderzoekers de mechanismen van genregulatie en de rol van verschillende factoren of mutaties onderzoeken.
Genexpressiesystemen: IPTG is een cruciaal onderdeel in verschillende genexpressiesystemen, zoals de op T7-promoters gebaseerde systemen.In deze systemen wordt de lac-promoter vaak gebruikt om de expressie van T7-RNA-polymerase aan te sturen, dat op zijn beurt doelgenen transcribeert onder de controle van T7-promotersequenties.IPTG wordt gebruikt om de expressie van T7-RNA-polymerase te induceren, wat leidt tot de activering van doelgenexpressie.
| Samenstelling | C9H18O5S |
| Analyse | 99% |
| Verschijning | wit poeder |
| CAS-nr. | 367-93-1 |
| Inpakken | Klein en omvangrijk |
| Houdbaarheid | 2 jaar |
| Opslag | Op een koele en droge plaats bewaren |
| Certificering | ISO. |
