Fenylgalactoside, ook bekend als p-nitrofenyl β-D-galactopyranoside (pNPG), is een synthetisch substraat dat vaak wordt gebruikt in biochemische en moleculair biologische experimenten.Het wordt vaak gebruikt om de activiteit van het enzym β-galactosidase te detecteren en te meten.
Wanneer fenylgalactoside wordt gehydrolyseerd door β-galactosidase, komt p-nitrofenol vrij, een geelgekleurde verbinding.Het vrijkomen van p-nitrofenol kan kwantitatief worden gemeten met behulp van een spectrofotometer, aangezien de absorptie van p-nitrofenol kan worden gedetecteerd bij een golflengte van 405 nm.